【摘 要】
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目的构建海人藻酸受体亚基GluR6的shRNA真核细胞表达载体,进一步研究GluR6在脑缺血中的作用机制。方法根据GenBank数据库中GluR6的cDNA序列设计靶序列,化学合成两条互补的DNA
【机 构】
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徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心
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目的构建海人藻酸受体亚基GluR6的shRNA真核细胞表达载体,进一步研究GluR6在脑缺血中的作用机制。方法根据GenBank数据库中GluR6的cDNA序列设计靶序列,化学合成两条互补的DNA寡核苷酸链,连接质粒后转染大肠杆菌,使其在大肠杆菌内大量复制;提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定及测序分析。结果限制性内切酶酶切鉴定及测序分析证实了序列的正确性,与合成的寡核苷酸序列完全相符,且以正确的方向插入。结论成功构建了GluR6特异性shRNA真核表达载体。
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