探讨细胞周期依赖激酶2(cdk2)重组慢病毒在内毒素(LPS)导致急性肺损伤(ALI)中的作用。
方法36只成年SD大鼠按随机数字表法分为对照组、LPS模型组、基因干预组，每组12只。通过气管滴加LPS的方法成功复制大鼠LPS致ALI动物模型。对照组于伤后0，24，48 h气管滴加60 μl/kg等渗盐水；LPS模型组于伤后0，24 h气管滴加60 μl/kg对照慢病毒，伤后48 h给予对照组同等体积的LPS等渗盐水；基因干预组于伤后0，24 h气管滴加60 μl/kg cdk2重组慢病毒，伤后48 h给予对照组同等体积的LPS等渗盐水。伤后24 h，取各组右肺下叶肺组织200 mg，HE染色观察肺组织病理变化；Western blot法检测组织cdk2、Clara细胞分泌蛋白(CCSP)、磷脂酶A2(PLA2)和磷酸化C/EBP β (p－C/EBP β)的蛋白表达；采集各组伤后24 h新鲜血液，ELISA法检测血液中肿瘤坏死因子－α(TNF－α)、白细胞介素(IL)－1β、IL－6、IL－10的含量。
结果伤后24 h，与对照组比较，LPS模型组肺组织炎性浸润明显，肺泡组织结构损伤严重；与LPS模型组比较，基因干预组大鼠肺组织炎性浸润则明显减弱，肺泡结构趋于正常。基因干预组cdk2含量(4.29±0.73)明显高于对照组(1.00±0.21)和LPS模型组(0.93±0.17)(P<0.05)；基因干预组CCSP表达量(3.19±0.38)明显高于对照组(1.00±0.20)及LPS模型组(0.32±0.19)(P<0.05); LPS模型组PLA2表达量(4.49±0.51)明显高于对照组(1.00±0.13)和基因干预组(1.76±0.26)(P<0.05)；三组p－C/EBP β浓度变化趋势与CCSP相似。LPS模型组TNF－α表达量[(196.34±30.17)pg/ml]明显高于对照组[(71.24±5.13)pg/ml]和基因干预组[(86.32±11.02)pg/ml](P<0.05)；三组IL－1β、IL－6、IL－10变化趋势与TNF－α相似。
结论cdk2过表达可使CCSP蛋白表达增加，PLA2、TNF－α、IL－1β、IL－6、IL－10表达减少，对于LPS导致的ALI起到肺保护作用，可能与调控C/EBP β磷酸化程相关。