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目的改进的HPLC法测定血清中甲氨蝶呤（MTX）浓度的方法。方法采用Intersil C8（250mm×4．6mm，5μm）的色谱柱。流动相：乙腈-水-冰醋酸-三乙胺（14：86：0．5：0．3，V／V），以甲硝唑为内标，紫外检测波长306nm。结果本法MTX在38．86～5132μg·L^-1质量浓度内线性关系良好，r=0．9996，MTX高、中、低3种浓度的萃取平均回收率为77．6％，方法回收率平均为99．3％。日内、日间RSD均〈5％，最低血清检测浓度15μg·L^-1