SEREX方法鉴定CTCL细胞肿瘤抗原

来源 :解放军医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:china_huohou
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目的分离纯化皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)细胞系SeAx细胞膜蛋白并制备多克隆抗体。利用SEREX法从SeAx cDNA噬菌体表达文库中筛选肿瘤抗原。方法培养SeAx细胞至2×10^10个,用组织匀浆器匀浆后差速离心法分离细胞各组分,富集细胞膜抗原。用细胞器特异性抗体对纯化步骤中的各组分进行检测。用膜蛋白组分免疫家兔4次,每次免疫后用ELISA法测定血清抗体滴度。4次免疫后用Western blot方法测定多抗与SeAx细胞各组分蛋白反应的特异性。重组噬菌体感染大肠杆菌,将表达的重组蛋白转印到硝酸
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