烷烃羟化酶基因alkB表达载体的构建及其在大肠杆菌中的诱导表达

来源 :中华航海医学与高气压医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tjh2088
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目的 构建烷烃羟化酶基因alkB表达载体并检测其在大肠杆菌的表达.方法 体外合成alkB基因,选择烷烃表达载体pCom8,构建含alkB基因的重组质粒pCom8-alkB,并采用CaCl2法将其转入大肠杆菌DH5α中,通过十二烷基碘酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测不同诱导条件下的alkB基因表达的变化.结果 构建的含alkB基因的重组质粒在DH5α中得到有效表达,且随诱导时间的延长而增加,在柴油诱导浓度为2%~3%(V/V)时,目的蛋白表达量相对较大.结论 成功构建了含alkB基因的表达载体,阐明了不同诱导条件对目的蛋白表达的影响规律。

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