【摘 要】
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目的 以昆虫sf2 1、sf9细胞表达、分泌人源脂多糖结合蛋白的氨基末端片段 (NH LBP) ,并初步观察其生物学特性。方法 以昆虫sf2 1和sf9细胞于完全Grace培养基中分别扩增编码
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目的 以昆虫sf2 1、sf9细胞表达、分泌人源脂多糖结合蛋白的氨基末端片段 (NH LBP) ,并初步观察其生物学特性。方法 以昆虫sf2 1和sf9细胞于完全Grace培养基中分别扩增编码人源NH LBP的杆状病毒 ,再以sf2 1和sf9细胞于SF 90 0Ⅱ无血清培养基中表达NH LBP ,并以TALON柱芯对NH LBP进行亲和纯化 ,此后以Tris Tricine电泳、毛细管电泳、流式细胞分析实验 (flowcytometryanalysis)、TNFa分泌实验的方法鉴定NH LBP的纯度及生物学活性。结果 昆虫sf2 1和sf9细胞均能有效地扩增编码NH LBP的杆状病毒 ,其中sf9细胞扩增病毒的能力为sf2 1细胞的 1 18倍。sf2 1细胞成功地表达、分泌NH LBP ,并经TALON柱芯亲和纯化 ,其纯度达 98%,NH LBP具有明确的与脂多糖 (LPS)结合的生物学活性 ,而sf9细胞却不能表达、分泌NH LBP。结论 以昆虫sf2 1细胞分泌表达具有活性人源NH LBP是可行的 ,昆虫sf9细胞可扩增编码NH LBP的杆状病毒 ,但不能表达、分泌NH LBP。
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