重组人脂多糖结合蛋白的氨基末端片段在昆虫细胞中的表达、纯化及功能鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ZXFAMD
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 以昆虫sf2 1、sf9细胞表达、分泌人源脂多糖结合蛋白的氨基末端片段 (NH LBP) ,并初步观察其生物学特性。方法 以昆虫sf2 1和sf9细胞于完全Grace培养基中分别扩增编码人源NH LBP的杆状病毒 ,再以sf2 1和sf9细胞于SF 90 0Ⅱ无血清培养基中表达NH LBP ,并以TALON柱芯对NH LBP进行亲和纯化 ,此后以Tris Tricine电泳、毛细管电泳、流式细胞分析实验 (flowcytometryanalysis)、TNFa分泌实验的方法鉴定NH LBP的纯度及生物学活性。结果 昆虫sf2 1和sf9细胞均能有效地扩增编码NH LBP的杆状病毒 ,其中sf9细胞扩增病毒的能力为sf2 1细胞的 1 18倍。sf2 1细胞成功地表达、分泌NH LBP ,并经TALON柱芯亲和纯化 ,其纯度达 98%,NH LBP具有明确的与脂多糖 (LPS)结合的生物学活性 ,而sf9细胞却不能表达、分泌NH LBP。结论 以昆虫sf2 1细胞分泌表达具有活性人源NH LBP是可行的 ,昆虫sf9细胞可扩增编码NH LBP的杆状病毒 ,但不能表达、分泌NH LBP。
其他文献
目的设计和构建整合素β1 (integrin β1)特异性的小干扰RNA表达载体,并初步验证其对靶基因的抑制作用.方法设计靶点特异性的寡核苷酸,连接到经BamHⅠ-HindⅢ酶切线性化的pSl
冠状动脉及其分支通常行走在心外膜组织的表面,当冠状动脉的某个节段行走于心肌中时,此现象称为心肌肌桥.冠脉造影报道心肌桥的检出率为0.5%~2.5%[1],心肌桥引起心肌缺血的机
本文比较了中日化工类本科四年级毕业环节的教育方式,发现在毕业生在选择导师、进入实验室、答辩和论文写作等方面都有所差异,相互之间各有所长,可以互相借鉴。
目的了解放射损伤条件下骨髓细胞的生物力学特性及与细胞间相互作用的关系.方法以6 Gy 60Co照射昆明系小鼠制备动物模型,以细胞电泳法检测骨髓细胞的细胞电泳率,荧光探针法测
目的研究甲啡肽、纳络酮对红藻氨酸、谷氨酸在大鼠海马兴奋作用的调制,探讨甲啡肽、纳络酮影响癫(疒间)生的可能机制.方法健康Wistar大鼠以1%戊巴比妥钠(3 ml/kg)腹腔注射麻
1临床资料患者,女,32岁,因孕39周,腹腔巨大肿瘤,呼吸困难不能平卧20d,于2004-02-11日入院.3月前曾在当地医院B超检查,提示右卵巢肿瘤.入院查体:腹部高度膨隆,患者只能半卧位,
转轨以来,波兰高等教育公共支出占预算的份额逐年下降,公立大学教师整体工资水平低下。这导致公立与私立高等教育机构教师的“共生”现象:转轨以来私立高等教育的兴盛受益于公立
我院对新世纪材料专业化学课程教学内容的设置进行了改革,建立起具有材料工程专业特色的"大学化学"课程体系.我院的教改体现工科特色,强调基础知识及其应用,增加了与国民经济