【摘 要】
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目的 研究人乳头瘤病毒(HPV)11型E7蛋白在原核细胞的表达及其在尖锐湿疣(CA)血清学诊断中的应用价值.方法 用PCR从CA患者组织中扩增HPV11 E7全长基因,构建重组质粒pET32a(+)/HPV11 E7,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后表达,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白质印迹法(WB)分析鉴定;经镍螯合亲和层析胶体(Ni-NTA Agarose)纯化HP
【机 构】
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325035,温州医学院微生物学和免疫学教研室,325035,温州医学院微生物学和免疫学教研室,325035,温州医学院微生物学和免疫学教研室,温州医学院附属二院妇产科,325035,温州医学院微生物
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目的 研究人乳头瘤病毒(HPV)11型E7蛋白在原核细胞的表达及其在尖锐湿疣(CA)血清学诊断中的应用价值.方法 用PCR从CA患者组织中扩增HPV11 E7全长基因,构建重组质粒pET32a(+)/HPV11 E7,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后表达,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白质印迹法(WB)分析鉴定;经镍螯合亲和层析胶体(Ni-NTA Agarose)纯化HPV11 E7融合蛋白后作抗原,用间接ELISA法对93例CA患者、43例宫颈癌患者和58名健康对照者血清标本进行IgG抗体检测.结果 HPV11 E7融合蛋白在原核表达系统中呈较高效表达(浓度为40μg/ml).CA组、宫颈癌组和健康对照组血清IgG抗体均值分别为1.545±0.131、0.586±0.155和0.674±0.150,阳性率分别为76.3%(71/93)、11.6%(5/43)和5.2%(3/58);CA组血清IgG抗体均值及阳性率均高于宫颈癌组和对照组(均P＜0.01).结论 HPV11 E7融合蛋白具较强的抗原性,用于CA血清学诊断试剂的研制具有临床应用价值。
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