【摘 要】
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【背景】牛分枝杆菌（Mycobacterium bovis， M. bovis）是重要的人畜共患病原体，严重危害公共卫生安全。巨噬细胞是牛分枝杆菌感染的主要效应细胞，M1型巨噬细胞极化对于宿主免疫防御M. bovis感染至关重要。【目的】探讨鸟苷酸结合蛋白5（guanylate-binding protein 5， GBP5）对M. bovis感染的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞M1、M2
【基金项目】
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国家重点研发计划（2021YFD1800503）；
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【背景】牛分枝杆菌（Mycobacterium bovis， M. bovis）是重要的人畜共患病原体，严重危害公共卫生安全。巨噬细胞是牛分枝杆菌感染的主要效应细胞，M1型巨噬细胞极化对于宿主免疫防御M. bovis感染至关重要。【目的】探讨鸟苷酸结合蛋白5（guanylate-binding protein 5， GBP5）对M. bovis感染的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞M1、M2型极化的影响，以及GBP5在M. bovis感染中的作用。【方法】通过前期转录组学数据分析筛选出差异基因GBP5，通过体内、体外验证M. bovis感染后的GBP5的表达水平。小干扰RNA下调细胞内GBP5表达，分别利用RT-qPCR、Western blotting和流式细胞术检测M1、M2型巨噬细胞表面标志物表达变化；平板菌落计数法检测GBP5对M. bovis在巨噬细胞中复制的影响；双萤光素酶报告基因试验检测GBP5对STAT3转录调控；Western blotting检测ROS抑制后STAT3的磷酸化情况。【结果】GBP5在M. bovis感染的RAW264.7细胞和C57BL/6小鼠组织中表达增加；下调GBP5后细胞内细菌CFU在感染后不同时间点均显著增加，ROS释放减少，M1型巨噬细胞表面标志物表达减少，但是对M2型巨噬细胞无显著影响；下调GBP5后抑制了STAT3的转录启动。ROS的产生抑制了STAT3的磷酸化。【结论】GBP5促进ROS的产生，调控ROS/STAT3通路，促进巨噬细胞向M1型极化，从而抑制细胞内牛分枝杆菌的存活。
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