论文部分内容阅读
用RT-PCR方法扩增出新城疫病毒标准强毒株F48E8的F基因,并将其克隆到pGEM-T载体,命名为pGEM-NDF。鉴定正确后,以BamHⅠ和XbaⅠ双酶切将F基因从pGEM-NDF中释放出来,并插入到pFast BacⅠ载体中,得到重组转移载体pFast—NDF。然后将该重组质粒转入含有穿梭质粒的感受态DH10Bac中,通过转座作用获得重组穿梭质粒reBacmid—NDF。再用reBacmid—NDF转染Sf9昆虫细胞,获得含有新城疫病毒F48E8株F基因的重组杆状病毒。间接免疫荧光和Western-