【摘 要】
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以3个河北核桃样品为材料,对ISSR反应体系中的主要影响因子DNA模板浓度,引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、退火温度进行优化筛选.最后确定河北核桃ISSR-PCR反应体系为20 μL体系
【机 构】
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河北省赞皇县林业旅游局,河北农业大学山区研究所,河北农业大学园艺学院
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以3个河北核桃样品为材料,对ISSR反应体系中的主要影响因子DNA模板浓度,引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、退火温度进行优化筛选.最后确定河北核桃ISSR-PCR反应体系为20 μL体系中含10＜CR Buffer （Mg2＋ Plus）2μL,dNTPs（各2.5 mM）1.6 μL,TaqDNA聚合酶1.0U,引物25 μM,模板DNA 50 ng.反应的基本程序为：94℃预变性5 min（1个循环）,然后94℃变性30 s,52℃退火60 s,72℃链延伸60 s（32个循环）,72℃延伸10 m
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