论文部分内容阅读
为更加快速、灵敏地检测草鱼呼肠孤病毒（Grass Carp Reovirus，GCRV），建立环介导等温扩增（RT—LAMP）检测方法。根据GenBank中GCRV HZ08等毒株VP6蛋白基因序列设计引物，以GCRV弱毒疫苗株（GCHV-892）总RNA为模板建立RT—LAMP反应，对扩增产物用限制性内切酶PvuII进行酶切鉴定，所得酶切产物大小符合预期值。随后对LAMP反应体系包括Mg^2＋、dNTPs、甜菜碱（betaine）和内外引物浓度比进行了优化，并以含VP6蛋白基因的重组质粒（pEASY—V