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目的 探讨类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-99a的表达与辅助性T细胞17(T helper cell 17,TH17)、调节性T细胞(regulatory cells,Treg)比率失衡的关系.方法 收集于我院就诊的RA患者80例,分为活动期RA组(42例)和稳定期RA组(38例),以体检健康者42例作为健康人对照组.流式细胞术测定各组外周血PBMC中TH17、Treg细胞数;ELISA法检测各组血清IL-17、IL-6、TFN-α、IFN-γ、IL-4和IL-10的表达水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别测定TH17和Treg细胞特异性转录因子RORγt和FoxP3 mRNA以及RA患者PBMC中miR-99a的表达水平;western blot检测各组RORγt和FoxP3蛋白的表达水平.结果 与健康人对照组相比,活动期和稳定期RA患者的TH17细胞数、RORγt mRNA和蛋白质的表达水平均显著升高,Treg细胞数及FoxP3 mRNA和蛋白质的表达水平均显著降低(P均<0.01).活动期RA患者血清IL-17、IL-6、TNF-α、IFN-γ的表达水平均显著升高,而IL-4和IL-10的表达水平均显著降低(P均<0.01).此外,活动期RA患者TH17细胞中miR-99a的表达水平显著升高,Treg细胞中miR-99a的表达水平显著降低(P均<0.01).Pearson相关分析结果显示,RA患者TH17细胞中miR-99a与RORγt mRNA的表达水平呈正相关(r=0.721,P<0.01),Treg细胞中miR-99a与FoxP3mRNA的表达水平呈正相关(r=0.815,P<0.01).结论 RA患者TH17和Treg细胞中miR-99a的表达与TH17、Treg细胞发育分化关键转录因子RORγt、FoxP3密切相关,miR-99a可能通过影响RORγt和FoxP3,参与RA患者TH17/Treg细胞比率失衡.