【摘 要】
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目的:探讨miR-496是否通过靶向mTOR影响宫颈癌HeLa细胞的周期、增殖、迁移、侵袭以及裸鼠移植瘤的生长.方法:选取2020年12月至2021年12月期间于河北医科大学第四医院接受手术的74例宫颈癌患者的肿瘤标本和癌旁组织标本,qPCR、WB法和免疫荧光法检测宫颈癌组织中miR-496和mTOR在mRNA和蛋白水平的表达.利用TargetScan数据库预测miR-496的靶基因并用双荧光素酶报告基因实验进行验证.将HeLa细胞按转染物不同分为对照组、miR-496 mimic组和miR-496 mi
【机 构】
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河北医科大学第四医院妇科,河北石家庄050011;晋州同济医院妇科,河北石家庄052260
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目的:探讨miR-496是否通过靶向mTOR影响宫颈癌HeLa细胞的周期、增殖、迁移、侵袭以及裸鼠移植瘤的生长.方法:选取2020年12月至2021年12月期间于河北医科大学第四医院接受手术的74例宫颈癌患者的肿瘤标本和癌旁组织标本,qPCR、WB法和免疫荧光法检测宫颈癌组织中miR-496和mTOR在mRNA和蛋白水平的表达.利用TargetScan数据库预测miR-496的靶基因并用双荧光素酶报告基因实验进行验证.将HeLa细胞按转染物不同分为对照组、miR-496 mimic组和miR-496 mimic+pMIR-mTOR组,CCK-8法、流式细胞术和Transwell实验分别检测miR-496和mTOR对HeLa细胞增殖、周期、迁移和侵袭的影响.将对照组、miR-496 mimic组HeLa细胞接种至BALB/c裸鼠皮下构建宫颈癌裸鼠移植瘤模型,21d后处死小鼠,剥离小鼠肿瘤组织并称取瘤质量,免疫荧光法和WB法检测miR-496过表达对移植瘤组织中mTOR和Ki67表达的影响.结果:在宫颈癌组织中,miR-496呈低表达,而mTORmRNA和蛋白呈高表达.miR-496能够靶向结合mTORmRNA的3\'-UTR.与对照组和miR-496 mimic+pMIR-mTOR组相比,miR-496 mimic组HeLa细胞的miR-496水平和S期细胞比例均显著升高,而增殖水平、迁移和侵袭细胞数均显著降低(均P＜0.01).成功构建宫颈癌裸鼠移植瘤模型,接种21d后,miR-496 mimic组移植瘤质量、移植瘤组织中mTOR和Ki67的表达水平均显著低于对照组(均P＜0.01).结论:miR-496在宫颈癌组织中呈低表达,miR-496过表达可通过靶向调控mTOR抑制HeLa细胞的恶性生物学行为和裸鼠移植瘤的生长.
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