果蝇血液发育标记基因Dox-A3多克隆抗体的制备

来源 :湘南学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tonyyu9

【摘要】

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从野生型成体果蝇体内提取总RNA，以cDNA作为模板进行PCR扩增，获取Dox-A3部分基因片段，将这片段连接于原核表达载体pET-28a上，成功构建重组质粒pET-28a-Dox-A3．将重组质粒转化大肠

【作者】

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苏勇蔡哲彦江志钢袁婺洲吴秀山

【机构】

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湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室

【出处】

：

湘南学院学报

【发表日期】

：

2012年5期

【关键词】

：

Dox—A3基因果蝇原核表达多克隆抗体 Dox- A3 gene drosophila prokaryotic expression polyclo

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从野生型成体果蝇体内提取总RNA，以cDNA作为模板进行PCR扩增，获取Dox-A3部分基因片段，将这片段连接于原核表达载体pET-28a上，成功构建重组质粒pET-28a-Dox-A3．将重组质粒转化大肠杆菌菌株Rosetta，用ITPG诱导表达出融合蛋白，然后将经Ni-IDA凝胶柱纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备Dox-A3多克隆抗体，通过Western-Blot检测效价和特异性．结果表明，实验获得了高质量的多克隆抗体．

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