不同方法制作小鼠视网膜组织石蜡切片的比较

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目的探索一种具有较小组织变形与良好定位效果的小鼠视网膜固定方法。方法 BALB/C小鼠30只,随机分为3组,每组10只,处死后取眼球。A组在体积分数分别为55%、75%、95%乙醇中各脱水1h,然后于解剖显微镜下去除角膜、虹膜、晶状体,再于无水乙醇中各脱水2次,每次1h;B组脱水步骤同A组但不去除角膜、虹膜、晶状体;C组在体积分数分别为55%、65%、75%、85%、95%乙醇中各脱水30min,同A组去除角膜、虹膜、晶状体,再于无水乙醇中各脱水2次,每次30min,其余步骤相同。各组切片染色后于光镜下比较各组视网膜结构的完整性,并统计视网膜脱离发生率。结果 B组外核层局部断裂,IS/OS层出现广泛的分离;剔除晶状体的A组外核层保持完整,但IS/OS层仍存在局部的断裂;而剔除晶状体且缩短脱水时间的C组则可保持完整的小鼠视网膜结构,且染色鲜艳,层次分明。RPE层脱落即视网膜脱离情况显示:A组视网膜脱离率为70%,主要发生在周边1/2处;B组视网膜脱离率65%,脱离位置不固定且发生不同程度的碎裂、断裂;C组视网膜脱离率10%,主要发生在周边1/4处。结论 在小鼠眼球制片时切除晶状体与增加酒精浓度梯度缩短脱水时间可有效减少视网膜组织变形,更有助于视网膜的精确定位。
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