【摘 要】
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目的 探讨胱硫醚-β-合酶(CBS)启动子区的超甲基化与基因表达及功能的相关性.方法 通过结合重亚硫酸盐处理的直接测序、实时定量聚合酶链反应(PCR)、荧光偏振免疫法及免疫组
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目的 探讨胱硫醚-β-合酶(CBS)启动子区的超甲基化与基因表达及功能的相关性.方法 通过结合重亚硫酸盐处理的直接测序、实时定量聚合酶链反应(PCR)、荧光偏振免疫法及免疫组织化学等技术对不同叶酸浓度( 25、150 nmol/L)下培养的人正常结肠黏膜上皮细胞株(NCM460)细胞和患者组织样本(包括肿瘤组织及相应的正常组织95例)中CBS基因启动子区CpG岛超甲基化与基因表达及功能进行研究.结果 低叶酸浓度培养下NCM460细胞中CBS基因的表达下调,检测高甲基化组(H-M组:＞41.7％,83例)和低甲基化组(L-M组:≤41.7％,107例)组织样本中CBS基因表达水平,两组差异有统计学意义(P＜0.01).在NCM460细胞内,CBS基因的下调能够导致同型半胱氨酸积聚,检测H-mRNA组(＞3.19,45例)和L-mRNA组(≤3.19,40例)患者的血清中同型半胱氨酸的水平,L-mRNA组患者血清中同型半胱氨酸的水平显著高于H-mRNA组.结论 CBS启动子区的超甲基化极有可能导致CBS基因表达水平的下调,影响细胞内的甲基代谢,进而参与结直肠癌的发生、发展等一系列病程.
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