【摘 要】
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根据t-PA cDNA的全长序列,设计了扩增t-PA信号肽cDNA的引物,并进而获得了信号肽cDNA片段.将其回收纯化后,作为上游引物,结合原有的t-PA下游引物,分别以t-PA的缺失性原核表达
【机 构】
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宁夏大学生命科学学院,解放军军需大学军事兽医研究所,吉林白山市抚松县医院
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根据t-PA cDNA的全长序列,设计了扩增t-PA信号肽cDNA的引物,并进而获得了信号肽cDNA片段.将其回收纯化后,作为上游引物,结合原有的t-PA下游引物,分别以t-PA的缺失性原核表达载体pErA,以及后者的点突变体pErA(K)为模板,进行PCR反应,从而使二者各自增加了信号肽部分.进一步将其分别克隆至pcDNA3.0,构建了相应的真核表达载体pCSRA与pCSRK.酶切及测序结果均证明了构建的正确性.经LIPOFECTAMINE[TM]2000 Reagent将其分别转染至COS-7细胞,并
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