【摘 要】
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旨在初步探究猪m6A甲基化酶METTL3基因表达水平与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)诱导猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)损伤的关系.本研究构建了稳定干扰METTL3基因表达水平的IPEC-J2细胞系,用1 μg·mL-1 DON诱导METTL3干扰组和对照组猪肠上皮细胞48 h,通过实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因、免疫相关基因、抗氧化酶相关基因表达水平,同时测定细胞增殖活性、细胞周期、细胞凋亡以及活性氧(ROS)水平.结果显示,与对照组相比,干扰组免疫相关基因TNF-a、I
【机 构】
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扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室,扬州225009;扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室,扬州225009;扬州大学教育部农业与农产品安全国
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旨在初步探究猪m6A甲基化酶METTL3基因表达水平与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)诱导猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)损伤的关系.本研究构建了稳定干扰METTL3基因表达水平的IPEC-J2细胞系,用1 μg·mL-1 DON诱导METTL3干扰组和对照组猪肠上皮细胞48 h,通过实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因、免疫相关基因、抗氧化酶相关基因表达水平,同时测定细胞增殖活性、细胞周期、细胞凋亡以及活性氧(ROS)水平.结果显示,与对照组相比,干扰组免疫相关基因TNF-a、IL-6、IL-12的表达水平产生了显著变化(P＜0.05),凋亡相关基因Bax、Caspase3、Caspase9表达量均显著下降(P＜0.05),抗氧化酶相关基因GPXs、CuZn-SOD、CAT表达量显著上升(P＜0.05);细胞增殖活性显著提高,细胞总凋亡率显著降低(P＜0.05),ROS水平极显著降低(P＜0.01).本研究结果表明,METTL3基因表达水平降低能一定程度地帮助IPEC-J2细胞抵抗因DON诱发的细胞凋亡和炎症.METTL3表达下调有利于缓解DON对于细胞损伤产生的一系列炎症反应,为今后细致研究RNA甲基化修饰在仔猪抵抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇损害调控中的作用机制提供了理论基础.
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