【摘 要】
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目的 研究δ阿片受体激动剂D-丙2,D-亮5脑啡肽(DADLE)对人肝癌HepG2细胞增殖的影响,并探讨其与蛋白激酶C(PKC)途径的关系.方法 分别以0.01、0.1、1.0和10 μmol/L的DADLE处理
【机 构】
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大连医科大学附属第二医院普外科,大连医科大学附属第一医院普外科
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划);
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目的 研究δ阿片受体激动剂D-丙2,D-亮5脑啡肽(DADLE)对人肝癌HepG2细胞增殖的影响,并探讨其与蛋白激酶C(PKC)途径的关系.方法 分别以0.01、0.1、1.0和10 μmol/L的DADLE处理HepG2细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖活性,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测PKC mRNA和p-PKC蛋白的表达.分别以DADLE+纳曲吲哚(NAL)或佛波酯(PMA)处理HepG2细胞,采用流式细胞仪观察细胞周期,MTT法检测细胞的增殖活性,Western blot法检测p-PKC蛋白的表达.以DADLE+顺铂处理HepG2细胞,MTI法检测HepG2细胞的生长抑制率.结果 不同浓度的DADLE通过抑制HepG2细胞中PKC mRNA和p-PKC蛋白的表达对HepG2细胞的增殖发挥抑制效应.流式细胞仪检测结果显示,与对照组相比,DADLE处理组HepG2细胞中S+G2/M期细胞的比例降低了3.94％(P＜0.01)；给予NAL或PMA处理后,S+G2/M 期细胞的比例分别增加了3.22％和3.63％ (P＜0.01).MTT法和Western blot法检测结果显示,与对照组相比,DADLE处理组HepG2细胞的A570nm值和p-PKC蛋白的表达显著下降(P＜0.01)；给予NAL或PMA处理后,HepG2细胞的A570nm值和p-PKC蛋白的表达明显升高(P＜0.01).DADLE+顺铂处理组HepG2细胞的生长抑制率为79.9％,显著高于DADLE处理组(25.2％)和顺铂处理组 (43.2％,P＜0.01).结论 DADLE激活δ阿片受体对人肝癌HepG2细胞的增殖具有抑制作用,其机制与PKC途径相关.DADLE可增强HepG2细胞对顺铂的敏感性.
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