前脂蛋白乙二酰转移酶基因(lgt)与霍乱弧菌噬菌体VP3的受体相关

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sirius1394
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目的 研究霍乱弧菌噬菌体VP3的受体相关基因,确定前脂蛋白乙二酰转移酶基因在霍乱菌株可被VP3感染中的作用.方法采用转座子(TnphoA)插入,筛选对VP3感染产生抗性的突变株.Southern blot鉴定突变株染色体中TnphoA的拷贝数,利用反向PCR扩增TnphoA插入位点旁侧研究菌株的染色体序列.对扩增产物测序确定插入位点基因.另外,克隆被破坏基因的完整序列,转入该突变株,以反式互补实验确定回补突变株对VP3的敏感性.结果获得1株VP3的抗性转座突变株,Southern blot确定TnphoA在其中为单拷贝插入,反向PCR(IPCR)扩增得到插入位点处的结构基因为霍乱弧菌lgt基因,其表达产物为前脂蛋白乙二酰转移酶(Lgt).反式互补表明突变株恢复了对VP3的敏感性.结论前脂蛋白乙二酰转移酶在赋予霍乱菌株噬菌体VP3的敏感性方面有重要作用,可能为VP3转染的受体合成中的必需酶类。

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