重组人碱性成纤维细胞生长因子突变体[Ser^69，87]的表达、纯化及其稳定性研究

来源 :中国药科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yangsongzhao99

【摘要】

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目的:对野生型人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)进行突变改造以提高其稳定性.方法:采用PCR突变方法,将hbFGF cDNA第69位和87位的Cys密码子突变为Ser密码子,所得的突变片断插

【作者】

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吴晓萍冯辉李校堃苏志坚郑青黄亚东

【机构】

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暨南大学医药生物技术研究开发中心

【出处】

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中国药科大学学报

【发表日期】

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2005年2期

【关键词】

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人碱性成纤维细胞生长因子突变体稳定性 Human basic fibroblast growth factor Mutant Stabi lity

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划(863计划)，国家科技攻关项目

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目的:对野生型人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)进行突变改造以提高其稳定性.方法:采用PCR突变方法,将hbFGF cDNA第69位和87位的Cys密码子突变为Ser密码子,所得的突变片断插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL21(DE3)/pET3c-[Ser69,87]hbFGF,IPTG诱导表达.通过离子交换、肝素亲和两步层析的方法分离纯化突变体蛋白[Ser 69,87]hbFGF.MTT法测定重组蛋白的促分裂活性.并对突变体蛋白的抗蛋白酶水解能力、热稳定性及其酸碱稳定性进行了检

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