【摘 要】
：
第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1和tRNALeu2,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动
【机 构】
：
中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室
论文部分内容阅读
第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1和tRNALeu2,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高10倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入40个氨基酸残基的变种LeuRS-A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNA Leu1和tRNALeu2接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS-A识别的关键.第二部分:在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因10倍以上.研究了它的α-亚基的N-端变化(LAEP…→MGIP…)对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N-端亲和水解的酰化酶.
其他文献
细胞外基质-整合素相互作用能显著影响胚泡的黏附、扩展和分化, 并能增强胚泡中尿激酶型纤溶酶原激活因子的表达, 因而是胚泡植入的关键因素之一. 焦点黏着激酶(FAK)是细胞外
采用农杆菌介导法将反义ACS基因导入加工番茄美东、UC-82中,用Southern杂交检测所获得的9株再生植株,结果表明有3株再生植株的染色体中有外源基因的插入。所获得的再生植株在
目的评价16 S～23 S rDNA间隔区序列寡核苷酸探针碱性磷酸酶显色与辣根过氧化物酶化学发光法对结核患者痰标本检测的应用价值.方法采用生物素标记5′端18 bp的寡核苷酸探针斑点
现在我们国家的医疗卫生条件相对来说还存在很多不完善的地方,尤其是农村现在还面临着看病难看病贵等诸多的问题,怎样做好农村疾病的预防工作是保障农村人口健康的主要措施之
目的 了解2013年辽阳市全市手足口病实验室检测结果,并对结果进行分析,从而得出2013年辽阳市手足口病发病情况及病原学特征,为实验室诊断手足口病提供依据.方法 采集2013年4-
目的 进行妇女产褥期营养保健知识与相关行为的调查研究.方法 通过分层整群抽样的方法,选取某地区经历过产褥期的2100名妇女作为调查对象,以问卷调查的方式,进行妇女产褥期营
在美国柽柳( Tamarix L.)被列为臭名昭著的十大外来杂草之一,而在中国,它则作为一种濒危物种生存状况堪忧.对多枝柽柳( Tamarix ramosissima Lbd.)气体交换进行研究,探讨其蒸
通过单株定性和定量的分析,发现中国特有的变种苦茶Camellia assamica var. kucha Chang et Wang其芽叶嘌呤碱依含量高低分别由1,3,7,9-四甲基尿酸、咖啡碱、可可碱组成,其中
通过用特殊树脂Nucleogen-DEAE 阴离子交换柱可有效地提纯和分离酵母苯丙氨酸tRNAphe ASL不同核苷酸的聚核苷酸 .经反相高效液相色谱进行定量核苷组分分析, 确认是否掺入了修
目的观察NMDA受体拮抗剂和NOS抑制剂对吗啡依赖大鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型表达的影响.方法 RT-PCR方法检测m1-5mRNA水平.结果吗啡依赖大鼠脊髓注射纳洛酮1h后脊髓m1、m2、m3 和m4及脑干m1表达较依赖组减少,MK801(0.125 mg*kg-1)处理后脊髓m2 、m3和m5 以及脑干m2 和m5表达增加,脊髓和脑干m1 和m4表达减少;NOS抑制剂 L-NAME(10 mg