【摘 要】
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目的制备抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体,并检测其对尿素酶活性的抑制能力.方法以重组UreB蛋白为免疫原,通过杂交瘤技术制备抗UreB单克隆抗体,用ELISA检测mAb的
【机 构】
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第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室
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目的制备抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体,并检测其对尿素酶活性的抑制能力.方法以重组UreB蛋白为免疫原,通过杂交瘤技术制备抗UreB单克隆抗体,用ELISA检测mAb的效价、亲和常数;用Western blot检测mAb的特异性.将尿素酶与单克隆抗体预孵育后加入含有尿素和酚红的缓冲液,于550 nm测定单克隆抗体对尿素酶活性的抑制能力.结果得到5株稳定分泌抗UreB的单克隆抗体的杂交瘤细胞:1D5、9E1、 3A2、1D6、 6E6.测定抗体亚型:1D5,9E1, 3A2为IgG1,1D
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