中性粒细胞弹力蛋白酶引起黏蛋白5AC高表达的信号转导机制

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目的 研究中性粒细胞弹力蛋白酶(NE)通过表皮生长因子受体(EGFR)引起黏蛋白(MUC)5AC高表达的上游信号通路.方法 培养人气道BEAS-2B上皮细胞,给予NE刺激,以肿瘤坏死因子转换酶抑制剂-1(TAPI-1)及活性氧(ROS)清除剂DMTU为干预因素.RT-PCR检测干预前后细胞中MUC5AC mRNA含量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测培养上清中MUC5AC、可溶性转化生长因子(TGF)-α蛋白含量;Western印迹分析磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)蛋白水平.结果 NE刺激后引起MUC5AC基因转录和蛋白表达水平明显高于未给予NE刺激的对照组(P<0.01),同时伴随可溶性TGF-α及p-EGFR蛋白水平的增高,与对照组相比,差异有统计学意义(均P<0.01);加入浓度为20 μmol/L的肿瘤坏死因子转换酶抑制剂TAPI-1后可明显下调上述指标的表达水平(均P<0.01),DMTU也同样降低了MUC5AC的基因转录、产物水平以及可溶性TGF-α蛋白相对含量,与单纯NE刺激组比较差异均有统计学意义(P<0.01),但对单纯外源性TGF-α刺激组引起的MUC5AC基因转录和蛋白合成增加无明显作用(均P>0.05).结论 NE能刺激细胞产生ROS,再活化肿瘤坏死因子转换酶(TACE)引起黏蛋白产生的增多,组成EGFR通路上游的主要信号分子,故ROS/TACE/TGF-α前体/EGFR转导途经是NE引起气道黏液高分泌的重要机制。

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