【摘 要】
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目的 组织工程皮肤已逐渐应用于临床,但其免疫原性仍存在争议.通过重度联合免疫缺陷(severecombined immunodeficiency,SCID)小鼠重建人免疫系统,观察移植的组织工程皮肤的免
【机 构】
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第三军医大学大坪医院野战外科研究所皮肤科,重庆,400042
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目的 组织工程皮肤已逐渐应用于临床,但其免疫原性仍存在争议.通过重度联合免疫缺陷(severecombined immunodeficiency,SCID)小鼠重建人免疫系统,观察移植的组织工程皮肤的免疫排斥情况. 方法 按朱堂友等的方法体外构建组织工程皮肤和无细胞真皮基质.取雄性4～6周龄SCID小鼠20只,体重16～17 g,随机分为4组(n=5).A、B、C组于小鼠侧腹部切除1 cm×1 cm大小全层皮肤后,A组移植组织工程皮肤,B组移植自愿捐赠的人包皮,C组将无细胞真皮基质埋植皮下;D组为正常对照,不作处理.移植术后2周A、B、C组取材行HE染色,观察各移植材料存活情况.并于各组小鼠腹腔注射3×10~7个人脾淋巴细胞,4周内定期行大体、组织学、免疫组织化学、人IgG免疫荧光染色,观察是否发生免疫排斥反应. 结果 HE染色示A组组织工程皮肤具有真、表皮双层结构,类似人正常皮肤组织;B组人包皮仍保持人皮肤的正常组织结构;C组无细胞真皮基质位于原位,无明显被降解迹象.植入人脾淋巴细胞后,A、C、D组HE染色未见明显炎性细胞浸润;同时间点B组炎性细胞浸润程度均明显高于其他3组,比较差异有统计学意义(P<0.05).A组植入人脾淋巴细胞2周后表皮全层细胞抗人角蛋白14单克隆抗体(monoclonal anti-body,mAb)染色阳性,抗人Ⅳ型胶原mAb染色阳性;A、C、D组抗人CD3、CD4、CD8 mAb染色均未见阳性细胞;B组2周后真皮、皮下组织中大量抗人CD3、CD4和CD8 mAb染色阳性细胞.A、C、D组于植入人脾淋巴细胞后人IgG免疫荧光染色均未见阳性结果;B组3周后真皮深部大血管管壁人IgG mAb免疫荧光染色阳性. 结论 组织工程皮肤免疫原性较弱,植入SCID小鼠后未见明显的免疫排斥反应.
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