【摘 要】
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采用戊二醛两步交联法将辣根过氧化物酶(HRP)结合于甲胎蛋白(AFP)抗体上制成酶标AFP抗体,质量鉴定结果表明其比活性为200 U/mg,抗体效价为1∶256,满足酶联免疫吸附测定法(ELI
【机 构】
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天津大学药物科学与技术学院,内蒙古师范大学生物工程研究中心,内蒙古医院肿瘤科
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采用戊二醛两步交联法将辣根过氧化物酶(HRP)结合于甲胎蛋白(AFP)抗体上制成酶标AFP抗体,质量鉴定结果表明其比活性为200 U/mg,抗体效价为1∶256,满足酶联免疫吸附测定法(ELISA)要求;通过滴定法确定酶标AFP抗体的最适工作稀释度为V(酶标抗体)∶V(磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液)=1∶160;血清用量及孵育时间的影响实验表明:血清100μL、孵育时间2 h为最佳测定条件。建立了肝癌患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的规范化检测程序。初步应用实验显示:免疫磁珠ELISA法测定受试健康组血清AFP值平均为3.9 ng/mL,肝癌组血清AFP值平均为316.7 ng/mL,对肝癌诊断阳性率为72.0%。批内及批间CV值分别为5.05%和8.20%。该项技术有较高的灵敏度和很好的特异性,操作简便、分离快速,适用于肝癌的初期快速诊断。
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