【摘 要】
：
目的:本研究尝试使用添加无外泌体血清(E x o s o m e-d e p l e t e d F B S)的培养基培养细胞并提取外泌体,比较无外泌体血清和传统的无血清两种不同的培养条件对结肠癌H C
【机 构】
：
北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室
论文部分内容阅读
目的:本研究尝试使用添加无外泌体血清(E x o s o m e-d e p l e t e d F B S)的培养基培养细胞并提取外泌体,比较无外泌体血清和传统的无血清两种不同的培养条件对结肠癌H C T116细胞外泌体分泌的影响,旨在优化外泌体提取条件,使之有利于后续功能研究.方法:采用提取前24 h无血清和添加无外泌体血清培养基培养结肠癌细胞,普通光学显微镜下观察两种培养条件下细胞的生长和形态,用超速离心法分步提取分泌到细胞培养上清中的外泌体,透射电子显微镜下观察外泌体的形态,蛋白免疫印迹法分析外泌体标志蛋白,以及纳米颗粒追踪计数分析外泌体大小和含量.结果:与无血清培养条件相比,添加无外泌体血清培养的HCT116细胞生长状态良好,细胞无明显死亡现象.两种培养条件分泌的外泌体形态相近,均呈圆形或椭圆形,由脂质双分子层包裹的小囊泡,直径为40-100 nm.无外泌体血清培养条件分泌的外泌体大约是无血清培养的6倍,二种培养条件下提取的外泌体直径均为90 nm左右,与电镜结果一致.两种培养条件提取的外泌体中均检测到HSP70和CD63外泌体标志蛋白.结论:添加无外泌体血清培养HCT116细胞分泌的外泌体与无血清培养相比无明显差异,但添加无外泌体血清培养的细胞状态比无血清培养的细胞状态好,外泌体的分泌可能更接近生理条件下的生长环境,分泌的外泌体数量更多,因此无外泌体血清培养条件较无血清培养更适合结肠癌来源外泌体的提取和研究.
其他文献
金属间化合物/陶瓷复合材料由于具有很多优秀的性能而被广泛应用在工程领域中,本文主要介绍金属间化合物/陶瓷复合材料的制备方法是粉末冶金法和金属熔渗法,主要包括粉末冶金
在喀雅克登塔格地区古元古代金水口群片麻岩、大理岩中,发现了一套变质侵入体。岩性为眼球状黑云二长片麻岩,经同位素年龄测定时代为新元古代,侵入体具有过铝钙碱性系列的特
目的探讨利用3D打印技术制作手术导板在高血压性脑出血血肿穿刺术中的应用价值。方法回顾性分析2013年3月至2017年9月收治的156例高血压性脑出血的临床资料,其中78例采用CT引
目的:探讨血浆凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)在2型糖尿病(T2DM)大鼠肾损伤发病机制中的作用。方法:选用雄性Wistar大鼠36只,随机分成3组(正常组、糖尿病假手术组、糖尿病手术
<正>如果我们用"预算"来比喻学校课程领域的专业计划的话,"学校课程规划"是做学校全部课程的预算,如小学6年的全部课程,初中3年的全部课程,高中3年的全部课程,这个"全部课程"
采用双波长薄层扫描法测定了益母口服液中水苏碱的含量，用岛津ＣＳ－９３０型扫描仪于λ＿ｓ＝５１０ｎｍ，λ＿Ｒ＝７００ｎｍ波长处扫描，随行外标两点法计算含量。线性范围为１～１０μｇ，回归方程Ａ＝２９７．６０Ｃ－４９１．８０，ｒ＝０．９９９５。回收率为９６．６１％，ＲＳＤ＝２．６５％（ｎ＝５）。
概括文章的主要内容一直是中年级段学习的一个重点,更是提升学生语文学习能力的一种有效手段。笔者结合自己近期的一节公开课和一些思考,总结一下概括文章主要内容的方法。
随着我国经济的快速发展,国内汽车的保有量也不断的增加,汽车碰撞事故也随之增加,在众多的交通事故中,由于车体的侧面缓冲空间太小,而更容易使乘员受到伤害,这使得越来越多的
<正> 西南交大医院研制出一种治疗牛皮癣的独特方法——烟雾疗法。 该疗法不打针不吃药,而是根据中医“肺朝百脉,肺主皮毛”及“上焦如雾”等理论采用天然中药精制而成“香烟
电子商务在钢铁行业的快速发展离不开大数据技术的应用,同时钢铁电商的发展更需要大数据技术的支撑。文章在介绍钢铁行业电子商务发展以及大数据的基础上,分析了钢铁电商在运