论文部分内容阅读
目的 探讨褪黑素对创伤性脑损伤(TBI)模型小鼠脑组织红系衍生的核因子2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应原件(ARE)信号通路的激活及抗氧化应激作用.方法 6～8周龄ICR雄性小鼠116只,按随机数字表法分为假手术组、模型组、溶剂组、褪黑素组.每组29只.后3组小鼠用经Flierl改良的自由落体撞击法制作TBI模型,褪黑素组小鼠于伤后0、1、2、3、4h腹腔注射褪黑素(10 mg/kg,3 mg/mL稀释于生理盐水),溶剂组小鼠于相同时间点注射等量生理盐水.伤后24 hFJC染色检测小鼠挫伤灶周围皮层变性神经元的数量;干湿重比法检测小鼠的脑组织含水量;比色法检测小鼠脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的含量;Western blotting检测小鼠脑组织Nrf2核、浆蛋白以及磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶1(NQO1)、血红素氧化酶1(HO-1)蛋白的表达;RT-PCR法检测小鼠脑组织HO-1和NQO-1 mRNA的表达;电泳迁移率实验(EMSA)观察小鼠脑组织中Nrf2和DNA的结合力.结果 与假手术组比较,模型组、溶剂组、褪黑素组小鼠挫伤灶周围皮层变性神经元数量、MDA含量、核Nrf2的表达、HO-1、NQO-1蛋白和mRNA的表达、脑组织含水量均较高,浆Nrf2的表达、GPx的含量较低;与溶剂组和模型组比较,褪黑素组小鼠挫伤灶周围皮层变性神经元数量、脑组织含水量、MDA含量、核Nrf2的表达均较低,浆Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白和mRNA的表达、GPx的含量均较高,差异有统计学意义(P＜0.05).假手术组和褪黑素组小鼠脑组织SOD含量高于模型组、溶剂组,差异有统计学意义(P＜0.05).EMSA检测显示假手术组、模型组和溶剂组、褪黑素组小鼠脑组织Nrf2的DNA结合力依次增高.结论 褪黑素可以提高TBI后脑组织抗氧化酶的含量,其机制可能与激活Nrf2-ARE信号通路有关.