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目的观察X线照射对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞株吉非替尼获得性耐药的体外逆转作用。方法选取表皮生长因子受体（EGFR）基因第19外显子突变的NSCLC细胞株PC-9为对照组,将吉非替尼诱导产生获得性耐药的NSCLC细胞株PC-9/AB分为耐药组和实验组,其中实验组细胞为耐药组细胞经放射线照射（DT:24 Gy/6Gy/4 F）后建立的放射线照射细胞株PC-9/AB IR。各组细胞分别给予不同浓度的吉非替尼,测算吉非替尼对各组细胞生长的半数抑制浓度（IC50）值以评价细胞对吉非替尼的敏感性。采用克隆成型实验观察各组细胞的放射敏感性。通过二代测序法（NGS）检测295基因panel观察各组细胞基因突变情况。采用Western-Blotting法检测各组细胞中的E-cadherin、Vimentin蛋白。采用流式细胞术测算各组细胞的凋亡率。结果吉非替尼抑制对照组、耐药组、实验组细胞生长的IC50值分别为（0.05±0.03）、（16.01±3.42）、（0.28±0.01）μmol/L,其中实验组IC50值低于耐药组（P<0.05）。克隆成型实验结果显示,对照组、耐药组、实验组细胞的存活分数分别为0.579±0.044、0.688±0.011、0.823±0.009,实验组细胞存活分数高于耐药组（P<0.05）。NGS测序结果显示实验组、耐药组均为EGFR基因第19外显子缺失突变细胞,且均携带T790M二次突变,均有TP53基因第7外显子的缺失突变。耐药组细胞中E-cadherin相对表达量低于对照组,实验组E-cadherin相对表达量高于耐药组（P均<0.05）;耐药组细胞中vimentin相对表达量高于对照组,实验组vimentin相对表达量低于耐药组（P均<0.05）。20、40、80μmol/L吉非替尼作用后,实验组细胞凋亡率均高于耐药组（P均<0.05）。结论 X线照射可逆转NSCLC细胞株对吉非替尼的获得性耐药,增强细胞对吉非替尼的敏感性,其机制可能与逆转EMT及促进细胞凋亡有关。