【摘 要】
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目的 研究α-硫辛酸(LA)对大鼠胶质瘤细胞(C6细胞)缺氧复氧诱导损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制. 方法 体外常规培养大鼠C6细胞,取对数生长期细胞用于实验.实验分正常组、模型组、10 μmol/L LA组、25 μmol/L LA组、50 μmol/L LA组.后4组细胞建立缺氧复氧模型,缺氧前12h后3组细胞分别加入10、25、50 μmol/L LA,正常组和模型组细胞加入等量培养液
【机 构】
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南方医科大学珠江医院药学部新药研发中心,广州,510280;
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目的 研究α-硫辛酸(LA)对大鼠胶质瘤细胞(C6细胞)缺氧复氧诱导损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制. 方法 体外常规培养大鼠C6细胞,取对数生长期细胞用于实验.实验分正常组、模型组、10 μmol/L LA组、25 μmol/L LA组、50 μmol/L LA组.后4组细胞建立缺氧复氧模型,缺氧前12h后3组细胞分别加入10、25、50 μmol/L LA,正常组和模型组细胞加入等量培养液.复氧12h后MTT检测5组细胞存活率;2,7-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧自由基(ROS)含量;流式细胞术、West blotting分别检测细胞凋亡率和活化caspase-3蛋白的表达. 结果 与正常组比较,模型组、10、25、50 μmol/L LA组细胞存活率降低,凋亡率增高;模型组细胞ROS含量增高,50 μmol/L LA组细胞ROS含量降低;模型组、10 μmol/LLA组细胞caspase-3蛋白表达增高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,25、50 μmol/LLA组细胞存活率升高;10、25、50 μmol/L LA组细胞ROS含量降低,凋亡率[(19.2±2.2)％vs(15.2±0.9)％、(13.1±0.7)％、(10.7±1.4)％]降低,caspase-3蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 LA对缺氧复氧诱导损伤的C6细胞具有保护作用,其机制可能与清除细胞内过量的ROS、抑制caspase-3途径依赖的细胞凋亡有关.
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