【摘 要】
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目的：探讨不同交联剂处理对脱细胞小肠黏膜下层（decellularized small intestinal submucosa，SIS）多孔支架理化性能及生物相容性的影响。方法：（1）将新鲜SIS塑形为三维多孔支架并采用戊二醛（glutaraldehyde，GA）、碳二亚胺[1-Ethyl-3-（3-dimethylaminopropyl） carbodiimide，EDC]及原花青素（proc
【机 构】
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北京大学口腔医学院·口腔医院修复科
【基金项目】
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国家自然科学基金（81801027）；
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目的：探讨不同交联剂处理对脱细胞小肠黏膜下层（decellularized small intestinal submucosa，SIS）多孔支架理化性能及生物相容性的影响。方法：（1）将新鲜SIS塑形为三维多孔支架并采用戊二醛（glutaraldehyde，GA）、碳二亚胺[1-Ethyl-3-（3-dimethylaminopropyl） carbodiimide，EDC]及原花青素（procyanidine， PA）3种交联剂进行交联，获得3组交联后支架，分别为GA组、EDC组、PA组。（2）理化性能评价：对各组多孔支架进行宏观形貌观察、使用场发射环境扫描电镜进行微观形貌观察并测定孔径及孔隙率，使用茚三酮法测定交联度，使用酶促降解法评价抗降解性能，使用万能力学测试机测定应力应变曲线及压缩强度。（3）生物相容性评价：使用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8， CCK-8）法检测交联处理对人骨髓间充质干细胞（human bone marrow mesenchymal stem cells，hBMSCs）增殖的影响，使用Calcein-AM/PI活死细胞染色法评价交联处理后支架的细胞毒性。结果:宏观形貌观察可见交联修饰未破坏支架三维结构；微观可见各组多孔支架具有大小均匀、相互连通的孔隙结构；EDC组孔径最大，与另两组差异具有统计学意义（P<0.05）；PA组孔隙率最低，与另两组比较差异有统计学意义（P<0.05）。PA组交联度最高而溶胀率最低，EDC组溶胀率最高。EDC组和GA组的体外降解速率均高于PA组，其中GA组降解速度最快，PA组抗降解能力最佳，降解至第15天时3组质量丧失率间的差异均有统计学意义（P<0.05）。EDC组和GA组压缩强度近似，PA组压缩强度最高，与另两组比较差异有统计学意义（P<0.05）。GA组支架的细胞毒性最大，hBMSCs在EDC组和PA组支架上具有更好的增殖能力，在GA组增殖较慢。结论:3种交联剂处理均可达到较高的交联度，经EDC和PA交联处理的SIS多孔支架在拥有较好理化性能的同时具有良好的生物相容性，相比于GA是更有应用前景的交联处理方法。
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