【摘 要】
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目的 探讨尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ,UⅡ)及其受体系统(urotensin Ⅱ receptor,UT)对急性肝衰竭(acute liver failure,ALE)小鼠肝脏自噬水平的影响.方法 ♂Balb/c小鼠随机分为
【机 构】
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南京医科大学附属上海松江中心医院感染科 上海交通大学附属第一人民医院松江分院感染科 上海市201600
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目的 探讨尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ,UⅡ)及其受体系统(urotensin Ⅱ receptor,UT)对急性肝衰竭(acute liver failure,ALE)小鼠肝脏自噬水平的影响.方法 ♂Balb/c小鼠随机分为4组(每组6只).A组:健康对照组;B组:预处理对照组;C组:模型组;D组:预处理模型组.B组和D组给予0.6 mg/kg Urantide 尾静脉注射预处理.30 min后,C组和D组立即以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)联合D-半乳糖胺(D-galactosamine,D-GaIN)腹腔注射诱导急性肝衰竭.LPS/D-GalN攻击6h后采集小鼠血清和肝组织样本.测量血清谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)水平以评价肝损伤情况.采用实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)检测Beclin-1、Atg5(autophagy related 5)、Atg7、Sqstml(sequestosome 1)/p62和LC3 mRNA(microtubule-associated protein 1 light chain 3)水平,采用免疫印记技术(Western blot)检测LC3及p62蛋白质含量.结果 模型组和预处理模型组ALT和AST水平与健康对照组和预处理对照组相比较均明显增高(P＜0.01),其中预处理模型组较模型组明显降低(P＜0.01).RT-PCR结果显示模型组和预处理模型组小鼠肝组织中Beclin-l、Atg5、Atg7、p62和LC3 mRNA水平均较健康对照组和预处理对照组低(P＜0.05);而模型组和预处理模型组、健康对照组和预处理对照组各自间比较均无统计学差异(P＞0.05).Western blot 结果也显示,模型组和预处理模型组小鼠肝组织中LC3和p62蛋白水平均较健康对照组和预处理对照组低(P＜0.05);而模型组和预处理模型组、健康对照组和预处理对照组各自间比较均无统计学差异(P＞0.05).结论 UⅡ/UT系统对LPS/D-GalN诱导ALF小鼠下调的肝组织自噬水平无明显影响.
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