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目的将唾液富组蛋白5（histatin5）的cDNA克隆至T载体，获取大量酶切后的目的片段。方法选用大肠杆菌偏爱密码子编码histatin5氨基酸，设计5′端带酶切位点、3′端互补的两条引物，通过overlapPCR获取histatin5的cDNA，将cDNA与T载体连接后转化大肠杆菌，筛选阳性克隆，PCR、酶切、测序鉴定。酶切重组T载体，获取目的片段。结果Histatin5的cDNA正确克隆至T载体，无突变。结论克隆载体构建成功，有利于目的片段的酶切和回收。