【摘 要】
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目的 探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)对原代培养大鼠门静脉平滑肌细胞增殖的作用及其机制.方法 原代培养大鼠门静脉平滑肌细胞,慢病毒转染上调其TMEM16A表达,分别加T16Ainh-A01和U
【机 构】
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430060,武汉大学人民医院消化系病研究所
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目的 探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)对原代培养大鼠门静脉平滑肌细胞增殖的作用及其机制.方法 原代培养大鼠门静脉平滑肌细胞,慢病毒转染上调其TMEM16A表达,分别加T16Ainh-A01和U0126后用Western blot法检测蛋白表达变化,流式细胞术观察细胞周期变化,细胞计数试剂盒(CCK-8)观察细胞增殖.结果 成功培养出大鼠门静脉平滑肌细胞并转染了TMEM16A,转染效率约为80％,流式细胞术结果显示过表达TMEM16A组S期细胞比例为(34.44±3.72)％,高于对照组的(15.56±2.36)％,差异有统计学意义(t=7.423,P＜0.01).Western blot显示各组细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)表达水平差异无统计学意义(t=2.338,P＞0.05).各组磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 TMEM16A可能通过影响丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)-ERK1/2通路活性来调控门静脉平滑肌细胞增殖,其表达在原代培养的大鼠门静脉平滑肌细胞增殖中起重要作用.
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