论文部分内容阅读
应用PCR方法扩增出亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒的VP1基因,继而构建出真核表达载体pVAX-VP1.再将含有巨细胞启动子CMV的目的基因表达盒连接到穿梭载体pVAX△E3上,筛选出VP1表达盒方向与E3区转录方向一致的重组子,获得转移载体.再经酶切,连接等方法获得重组腺病毒质粒.利用脂质体介导将重组质粒转染DK细胞,转染3次后,细胞出现明显的腺病毒病变.经PCR扩增、测序检测及基因组酶切鉴定,证明该病毒即为重组犬2型腺病毒.命名为CAV2/FMDV.经验证,该重组毒可稳定遗传,其毒价为103.5TCID50/mL.