【摘 要】
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目的:克隆及表达特异性抗原(PRAME)基因的cDNA片段. 方法:从人急性髓细胞白血病细胞系HL-60提取总RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从中扩增出PRAME 基因cDNA片段.将PRAME
【机 构】
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解放军第八一医院全军肿瘤中心内科,中山医科大学病理教研室,第四军医大学西京医院病理科
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目的:克隆及表达特异性抗原(PRAME)基因的cDNA片段. 方法:从人急性髓细胞白血病细胞系HL-60提取总RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从中扩增出PRAME 基因cDNA片段.将PRAME基因cDNA片段插入载体pGEM-T-easy中,经全自动序列分析仪测序正确后,再克隆至表达载体pGEX-4T-2中,构建高效表达克隆,并转化大肠杆菌进行表达. 结果:1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导5 h,PRAME蛋白表达即达高峰. 结论:PRAME基因在极少数正常组织
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