【摘 要】
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人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶（ＴＰ）在一些肿瘤组织中活性增高，但其功能目前了解尚少。构建了表达ＴＰ的重组逆转录病毒载体，直接导入人胰腺癌ＰＣ２细胞，ｍＰＣＲ扩增、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹和原位杂交证实转染细胞有外源
【机 构】
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中国医学科学院、中国协和医科大学北京协和医院病理科
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人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶（ＴＰ）在一些肿瘤组织中活性增高，但其功能目前了解尚少。构建了表达ＴＰ的重组逆转录病毒载体，直接导入人胰腺癌ＰＣ２细胞，ｍＰＣＲ扩增、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹和原位杂交证实转染细胞有外源ＴＰ的整合及表达；酶活性检测发现含外源ＴＰ细胞ＴＰ活性比ＰＣ２细胞的内源性ＴＰ活性高４０～７０倍；生长曲线和３ＨＴｄＲ参入率检测未发现含外源ＴＰ细胞生物学行为的改变。结果表明：成功地建立了表达ＴＰ基因的细胞株，为进一步研究ＴＰ的功能及特异性底物创造了条件。
Human thymidine phosphorylase (TP) activity is increased in some tumor tissues, but its function is still poorly understood. A recombinant retroviral vector expressing TP was constructed and directly introduced into PC-2 cells of human pancreatic cancer. mPCR amplification, Southern and Northern blots, and in situ hybridization confirmed the integration and expression of exogenous TP in the transfected cells; The TP activity of exogenous TP cells was 40-70-fold higher than that of PC-2 cells. The growth curve and 3H-TdR engraftment rate did not reveal any changes in the biological behavior of exogenous TP cells. The results showed that the cell line expressing TP gene was successfully established, which provided the conditions for the further study of the function and specific substrate of TP.
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