【摘 要】
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背景：既往研究表明，核因子E2相关性因子2/血红素加氧酶1信号通路在骨关节炎发生发展中至关重要，二甲双胍对软骨细胞具有一定的保护作用。目的：探讨二甲双胍对脂多糖诱导的软骨细胞损伤的保护作用及机制研究。方法：取SD大鼠软骨细胞进行体外分离培养和鉴定。选取第3代软骨细胞，分别用不同质量浓度的脂多糖（0,10,50,100,500,1 000和5 000μg/L）和二甲双胍（0,50,100,500,1
【基金项目】
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安徽省蚌埠医学院自然科学重点项目（2020byzd186）,项目负责人：韩俊柱；
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背景：既往研究表明，核因子E2相关性因子2/血红素加氧酶1信号通路在骨关节炎发生发展中至关重要，二甲双胍对软骨细胞具有一定的保护作用。目的：探讨二甲双胍对脂多糖诱导的软骨细胞损伤的保护作用及机制研究。方法：取SD大鼠软骨细胞进行体外分离培养和鉴定。选取第3代软骨细胞，分别用不同质量浓度的脂多糖（0,10,50,100,500,1 000和5 000μg/L）和二甲双胍（0,50,100,500,1 000,5 000和10 000μmol/L）处理细胞24 h，采用CCK8法检测细胞活性，筛选最适脂多糖和二甲双胍质量浓度。按照处理因素不同将软骨细胞分为空白组、脂多糖诱导组（5 000μg/L）和脂多糖（5 000μg/L）+二甲双胍组（1 000μmol/L）。流式细胞术检测各组软骨细胞凋亡情况；通过活性氧、丙二醛和超氧化物歧化酶试剂盒检测细胞氧化应激；RT-PCR和Western Blot检测软骨细胞白细胞介素1β、环氧化酶2、Ⅱ型胶原、核因子E2相关性因子2和血红素加氧酶1的mRNA和蛋白表达。结果与结论：（1）脂多糖降低了软骨细胞活力，诱导软骨细胞凋亡，而二甲双胍干预后细胞活力上升，凋亡率下降；（2）脂多糖诱导软骨细胞活性氧和丙二醛表达增加，超氧化物歧化酶活性下降，而二甲双胍干预后活性氧和丙二醛表达降低，超氧化物歧化酶活性增加；（3）脂多糖诱导软骨细胞白细胞介素1β、环氧化酶2表达增加，Ⅱ型胶原、核因子E2相关性因子2和血红素加氧酶1表达降低，而二甲双胍干预后白细胞介素1β和环氧化酶2表达降低，Ⅱ型胶原、核因子E2相关性因子2和血红素加氧酶1表达增加；（4）结果说明，二甲双胍能够抑制脂多糖诱导的软骨细胞损伤，发挥对软骨细胞的保护作用，其作用可能通过激活核因子E2相关性因子2/血红素加氧酶1信号通路实现的。
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