【摘 要】
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目的本研究旨在构建人可溶性白介素-1受体(sIL-1R)真核表达载体pcDNA3/sIL-1R,为研究骨关节病的基因治疗奠定实验基础.方法将人sIL-1R基因的RT-PCR纯化产物及质粒pcDNA3.1(+)
【机 构】
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610041,南京医科大学附属口腔医院口腔内科,四川大学华西口腔医院牙周科,广东省口腔医院口腔内科
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目的本研究旨在构建人可溶性白介素-1受体(sIL-1R)真核表达载体pcDNA3/sIL-1R,为研究骨关节病的基因治疗奠定实验基础.方法将人sIL-1R基因的RT-PCR纯化产物及质粒pcDNA3.1(+) DNA经KpnI和XhoI双酶切、胶回收纯化酶切片段后,体外连接酶切片段,使其定向重组,再将重组DNA转化E.coli Competent Cells JM109,经复苏后,在含Ampr的LB固体培养基上筛选出阳性克隆.结果挑取的LB固体培养基上的6个单菌落经酶切及测序鉴定,证实均为阳性克隆,即sI
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