人白细胞介素26的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cherrydarling
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
克隆人白细胞介素-26(human interleukin-26,hIL-26)基因,构建高效稳定的大肠杆菌表达菌株.对GenBank上报道的hIL-26基因进行序列分析后设计合成引物,利用RT-PCR技术从人外周血单个核细胞(PBMC)总RNA中反转录并扩增得到人成熟肽IL-26基因.将得到的基因克隆到pMD18-T载体中,菌落PCR筛选、酶切鉴定并进行DNA序列分析.用BamHI和EcoRⅠ将目的片段切下,插入表达载体pBV220相应的位点.42℃热诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE分析显示表达蛋白约占菌体总蛋白的20%,Western印迹法证实重组蛋白为特异性蛋白,分子筛纯化后纯度达90%以上.表达的重组蛋白经谷胱甘肽复性缓冲液复性,用RT-PCR检测复性的重组蛋白能促进PBMC合成IFN-γ.
其他文献
目的探讨脑磁图定位在手术治疗脑功能区肿瘤中的作用。方法2003年1月至2005年4月收治36例脑皮层运动区或附近肿瘤患者,其中脑膜瘤19例,神经上皮肿瘤14例(低度恶性胶质瘤9例,
目的根据患者头颅CT扫描数据,利用快速成形技术,构建三维头颅模型,评价基于头颅模型的模型外科在颅颌面畸形诊断治疗中的应用价值.方法对12例复杂颅颌面畸形患者进行电子束CT
目的观察烧伤后早期一次大面积切痂对大鼠心肌损伤的改善状况,并探讨其分子机制。方法将66只SD大鼠随机分为非切痂组(30只)、切痂组(30只)与正常对照组(6只)。将前两组大鼠造
[目的]探讨复位导向固定钳在治疗复杂髋臼骨折手术中的应用效果.[方法]对32例复杂髋臼骨折在手术治疗中,使用本科自行研制的复位导向固定钳对移位骨折进行复位固定或预固定,
目的加深对胆囊管低汇流的认识,提高对临床的指导意义.方法回顾我院ERCP检查中132例胆囊管低汇流病例,将其分为两型,并分析了胆囊管汇入胆总管的方向,胆囊管长度、内径及弯曲
目的观察胰淀素(amylin)在糖尿病肾病(DN)患者肾组织的沉积和分布特征,探讨肾脏Amylin沉积的致病意义及其影响因素。方法149例经肾活检证实的2型DN患者,免疫组化方法检测肾组
目的:探讨异种异体半月板移植对延缓关节软骨退变的作用。方法:对15只成年新西兰兔的后肢左、右膝均进行内侧半月板全切。在15只兔的左膝进行猪半月板组织成型后所得的异种异
目的观察结缔组织生长因子(CTCF)和多聚腺苷酸结合蛋白相互作用蛋白1(PAIP-1) mRNA在MG-63细胞培养不同阶段的表达,研究17β-雌二醇(E_2)对MG_63细胞CTGF和PAIP-1 mRNA表达的
目的:观察缺血预处理能否对大鼠缺血再灌注后海马CA1区神经元凋亡起拮抗作用,并探讨p53基因在其中的作用.方法:复制全脑缺血再灌注及缺血预处理模型,利用HE染色,流式细胞仪,R
目的探讨针型胸腔镜胸交感神经切断术治疗手汗症的安全性和有效性.方法2004年3月-2005年4月,采用2 mm针型胸腔镜和器械治疗手汗症患者62例,其中男性23例、女性39例,年龄12~53