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【摘要】 目的：评价血清中肝细胞生长因子(HGF)水平与肝硬化、肝癌和慢性肝炎的关系，探讨血清HGF水平作为肝脏疾病临床指标的价值。方法：采用固相酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中HGF的水平。结果：肝硬化患者的HGF水平显著高于正常对照组(P<0.01)，肝癌(HCC)和慢性肝炎(CH)患者的HGF水平明显高于正常对照组(P<0.05)。结论：HGF水平检测可作为肝脏疾病临床诊断和治疗的有价值指标。
【关键词】 肝细胞生长因子； 肝硬化； 肝癌； 慢性肝炎
在我国肝硬化(LC)、肝癌(HCC)和慢性肝炎(CH)是肝脏的一组重要和常见疾病，其发病率很高。慢性肝炎易发展为肝硬化，而肝硬化患者易转变成为肝癌，对上述肝病外周血的检测除AFP定量、γ-谷氨酰转移酶同工酶Ⅱ(-γGTⅡ)及α-L-岩藻糖苷酶升高作为辅助检查外，尚无其他有效的预测指标。因此，笔者拟通过测定患者外周血清中的肝细胞生长因子(HGF)水平，评价血清HGF水平与肝癌、肝硬化及慢性肝炎患者的关系，旨在探讨血清HGF作为肝脏疾病临床辅助诊断指标的价值。
1 资料与方法
1.1 一般资料 HCC患者50例，男41例，女9例。均经临床及影像学检查(CT、B超)及术后病理证实，术前取血。LC患者54例，男42例，女12例，根据门脉高压及肝细胞合成功能减退(低蛋白血症、凝血酶原时间延长)明确诊断。CH患者38例，男29例，女9例，根据2000年10月西安第十届传染病与寄生虫病学会议通过的“病毒性肝炎诊断标准”确诊。并以HBsAg为阴性，肝肾功能检查均正常的36例查体者为正常对照组，其中男27例，女9例。
1.2 标本处理 空腹抽取静脉血5 ml，待血液凝固后分离血清，置-20 ℃冰箱保存。
1.3 血清HGF检测 试剂盒由上海博力生物工程有限公司提供，严格按说明书进行操作。
1.4 统计学处理 各组间HGF含量的比较采用Mann-Whitncy作秩和检验，HGF水平与其他因素的相关性用Spearman法作相关分析。
2 结果
2.1 肝病患者血清中HGF的表达 LC、HCC、CH和正常对照组血清HGF的水平见表1。
表1 肝病各组血清HGF水平
*与LC组比较，P<0.01；△与HCC组比较，P<0.05；﹟与对照组比较，P<0.01
2.2 对LC组患者根据Child分级分层比较发现，血清HGF水平与LC分级相关，见表2。
表2 LC组血清HGF水平
2.3 血清HGF水平和其他临床、实验室指标的相关性 仅发现HGF与凝血时间的相关性(LC：r=0.377，P<0.01；HCC：r=0.389，P<0.01；LC+HCC+CH：r=0.418，P<0.01)。在HCC中，未发现血清HGF水平与肿瘤大小、病理分级有任何相关。
3 讨论
肝细胞生长因子(heoatocyte，growth factor，HGF)又称扩散因子(Scatter factor，SF)，最初是从血浆和血小板中纯化获得，被认为是一种刺激肝细胞生长增生的有丝分裂原，对肝切除或化学损伤后的肝再生起重要作用。
肝细胞生长因子(HGF)基因定位于人7号染色体的长臂上(7-q21.1)，长约70 kb，由18个外显子和17个内含子组成，HGF是最重要的肝再生介质之一，其受体c-Met为酪氨酸激酶型受体。 HGF是一种刺激肝细胞增生的因子，它与成纤维细胞分泌的扩散因子(SF)相同。HGF/SF与细胞膜相应受体c-Me结合，将信号传入细胞内，通过作用其下游信号传导通路，同细胞的生长、分化、血管生成等密切相关。其生物学功能主要是刺激并诱导包括肝细胞、上皮细胞、内皮细胞等多种细胞的生长、迁移和形态发生改变，在胚胎生长、组织形成中都有重要作用。近年报道，其在肿瘤的发生发展和转移中也有重要作用[2-4]。
在肝脏，HGF主要由肝间质细胞分泌，能刺激肝细胞的生长。CH、LC和HCC是肝脏的一组重要疾病，在国内的发病率很高，LC的主要病理变化是肝细胞持续性变性、坏死，并在其基础上出现肝内纤维结缔组织增生和肝细胞的结节状再生。笔者检测LC患者血清HGF含量，发现其远高于正常值，并发现HGF含量与LC病变程度有相关性，LC病变程度越高，其HGF含量越高，差异有显著性。LC患者血清中HGF增高很可能是由于肝间质细胞增生，HGF分泌增加所致。肝纤维化时血清HGF升高的原因可能与下列因素有关：(1)间质细胞对HGF的合成增加；(2)肝实质细胞对HGF的表达被启动；(3)慢性肝炎受损的肝细胞、内皮细胞使血小板凝聚释放更多的HGF；(4) HGF的灭活减少。目前除具有创伤性的肝活检外，血清学检查中仅有Ⅲ型前胶原氨端肽(PⅢNP)和透明质酸(HA)尚可用于LC的诊断，但仍不能对肝功能代偿期的早期LC进行诊断。在本文中，LC Child A级患者血清HGF含量的中位数为54.62 pg/m，如果以最佳临界点14 pg/m为界的话，两者之间有很大空间，提示血清HGF有诊断早期LC的可能。当然，这种推测还需要通过与肝活检对照后才能做出定论。
未发现血清HGF含量与肿瘤大小、病理分级等相关。尽管有报道认为，HGF的受体c-Met在多种肿瘤中有高表达，并可作为预后指标，但本文结果提示，血清HGF浓度并不是HCC很好的标记。在HCC中可能是HGF受体的表达更具有决定性。各方面实验结果显示，HGF受体c-Met在HCC组织中的表达高于癌周组织，而其表达高的患者其5年生存率降低，差异有显著性[5-6]。
本文结果显示，CH患者的血清HGF水平也有上升。虽然CH患者不具备LC的临床表现，但炎症活动时已造成肝细胞损伤，从而刺激间质细胞分泌HGF。或许部分患者已进入LC的早期阶段，但临床上尚未出现症状。
参考文献
[1] 中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会.病毒性肝炎防治方案[J].肝脏，2000，5(10)：257-263.
[2] Cao B，Su Y， Oskarsson M， et al.Neutralizing monoclonal antibodies tohepatocyte growth factor/scatter factor(HGF/SF) disply antitumoractivity in animal models[J].Proc Ncad Sci USA，2001，98(126)：7447-7448.
[3] Atabey N，Gao Y，Yao Z J， et al.Potent blockade of hepatocyte growthfactor stumulated cell motility， matrix invasion and branchingmorphogenesis by antagonists of Grb 2 Src homology 2 domin interaction[J].J Biol Chem，2001，276(15)：14308-14313.
[4] Furge K A，Zhang Y W，Vande W G F.Met receptor tyrosine kinase：enhanced signaling through adapter proteins[J]. Oncogene， 2000，19(21)：5582-5589.
[5] Ueki T，Fujimoto J，Suzuki T，et al. Expression of hepatocyte groethfactor and its receptor e-met pyotooncogene in hepatocellularcercinoma[J].Heaptology，1997，25(89)：862-866.
[6] 姚登福，顾文静，李月明.肝细胞癌变过程中相关生长因子的表达与动态变化[J].世界华人消化杂志，2008，16(23)： 2570-2575.
(收稿日期：2012-03-30) (本文编辑：陈丹云)
【关键词】 肝细胞生长因子； 肝硬化； 肝癌； 慢性肝炎
在我国肝硬化(LC)、肝癌(HCC)和慢性肝炎(CH)是肝脏的一组重要和常见疾病，其发病率很高。慢性肝炎易发展为肝硬化，而肝硬化患者易转变成为肝癌，对上述肝病外周血的检测除AFP定量、γ-谷氨酰转移酶同工酶Ⅱ(-γGTⅡ)及α-L-岩藻糖苷酶升高作为辅助检查外，尚无其他有效的预测指标。因此，笔者拟通过测定患者外周血清中的肝细胞生长因子(HGF)水平，评价血清HGF水平与肝癌、肝硬化及慢性肝炎患者的关系，旨在探讨血清HGF作为肝脏疾病临床辅助诊断指标的价值。
1 资料与方法
1.1 一般资料 HCC患者50例，男41例，女9例。均经临床及影像学检查(CT、B超)及术后病理证实，术前取血。LC患者54例，男42例，女12例，根据门脉高压及肝细胞合成功能减退(低蛋白血症、凝血酶原时间延长)明确诊断。CH患者38例，男29例，女9例，根据2000年10月西安第十届传染病与寄生虫病学会议通过的“病毒性肝炎诊断标准”确诊。并以HBsAg为阴性，肝肾功能检查均正常的36例查体者为正常对照组，其中男27例，女9例。
1.2 标本处理 空腹抽取静脉血5 ml，待血液凝固后分离血清，置-20 ℃冰箱保存。
1.3 血清HGF检测 试剂盒由上海博力生物工程有限公司提供，严格按说明书进行操作。
1.4 统计学处理 各组间HGF含量的比较采用Mann-Whitncy作秩和检验，HGF水平与其他因素的相关性用Spearman法作相关分析。
2 结果
2.1 肝病患者血清中HGF的表达 LC、HCC、CH和正常对照组血清HGF的水平见表1。
表1 肝病各组血清HGF水平
*与LC组比较，P<0.01；△与HCC组比较，P<0.05；﹟与对照组比较，P<0.01
2.2 对LC组患者根据Child分级分层比较发现，血清HGF水平与LC分级相关，见表2。
表2 LC组血清HGF水平
2.3 血清HGF水平和其他临床、实验室指标的相关性 仅发现HGF与凝血时间的相关性(LC：r=0.377，P<0.01；HCC：r=0.389，P<0.01；LC+HCC+CH：r=0.418，P<0.01)。在HCC中，未发现血清HGF水平与肿瘤大小、病理分级有任何相关。
3 讨论
肝细胞生长因子(heoatocyte，growth factor，HGF)又称扩散因子(Scatter factor，SF)，最初是从血浆和血小板中纯化获得，被认为是一种刺激肝细胞生长增生的有丝分裂原，对肝切除或化学损伤后的肝再生起重要作用。
肝细胞生长因子(HGF)基因定位于人7号染色体的长臂上(7-q21.1)，长约70 kb，由18个外显子和17个内含子组成，HGF是最重要的肝再生介质之一，其受体c-Met为酪氨酸激酶型受体。 HGF是一种刺激肝细胞增生的因子，它与成纤维细胞分泌的扩散因子(SF)相同。HGF/SF与细胞膜相应受体c-Me结合，将信号传入细胞内，通过作用其下游信号传导通路，同细胞的生长、分化、血管生成等密切相关。其生物学功能主要是刺激并诱导包括肝细胞、上皮细胞、内皮细胞等多种细胞的生长、迁移和形态发生改变，在胚胎生长、组织形成中都有重要作用。近年报道，其在肿瘤的发生发展和转移中也有重要作用[2-4]。
在肝脏，HGF主要由肝间质细胞分泌，能刺激肝细胞的生长。CH、LC和HCC是肝脏的一组重要疾病，在国内的发病率很高，LC的主要病理变化是肝细胞持续性变性、坏死，并在其基础上出现肝内纤维结缔组织增生和肝细胞的结节状再生。笔者检测LC患者血清HGF含量，发现其远高于正常值，并发现HGF含量与LC病变程度有相关性，LC病变程度越高，其HGF含量越高，差异有显著性。LC患者血清中HGF增高很可能是由于肝间质细胞增生，HGF分泌增加所致。肝纤维化时血清HGF升高的原因可能与下列因素有关：(1)间质细胞对HGF的合成增加；(2)肝实质细胞对HGF的表达被启动；(3)慢性肝炎受损的肝细胞、内皮细胞使血小板凝聚释放更多的HGF；(4) HGF的灭活减少。目前除具有创伤性的肝活检外，血清学检查中仅有Ⅲ型前胶原氨端肽(PⅢNP)和透明质酸(HA)尚可用于LC的诊断，但仍不能对肝功能代偿期的早期LC进行诊断。在本文中，LC Child A级患者血清HGF含量的中位数为54.62 pg/m，如果以最佳临界点14 pg/m为界的话，两者之间有很大空间，提示血清HGF有诊断早期LC的可能。当然，这种推测还需要通过与肝活检对照后才能做出定论。
未发现血清HGF含量与肿瘤大小、病理分级等相关。尽管有报道认为，HGF的受体c-Met在多种肿瘤中有高表达，并可作为预后指标，但本文结果提示，血清HGF浓度并不是HCC很好的标记。在HCC中可能是HGF受体的表达更具有决定性。各方面实验结果显示，HGF受体c-Met在HCC组织中的表达高于癌周组织，而其表达高的患者其5年生存率降低，差异有显著性[5-6]。
本文结果显示，CH患者的血清HGF水平也有上升。虽然CH患者不具备LC的临床表现，但炎症活动时已造成肝细胞损伤，从而刺激间质细胞分泌HGF。或许部分患者已进入LC的早期阶段，但临床上尚未出现症状。
参考文献
[1] 中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会.病毒性肝炎防治方案[J].肝脏，2000，5(10)：257-263.
[2] Cao B，Su Y， Oskarsson M， et al.Neutralizing monoclonal antibodies tohepatocyte growth factor/scatter factor(HGF/SF) disply antitumoractivity in animal models[J].Proc Ncad Sci USA，2001，98(126)：7447-7448.
[3] Atabey N，Gao Y，Yao Z J， et al.Potent blockade of hepatocyte growthfactor stumulated cell motility， matrix invasion and branchingmorphogenesis by antagonists of Grb 2 Src homology 2 domin interaction[J].J Biol Chem，2001，276(15)：14308-14313.
[4] Furge K A，Zhang Y W，Vande W G F.Met receptor tyrosine kinase：enhanced signaling through adapter proteins[J]. Oncogene， 2000，19(21)：5582-5589.
[5] Ueki T，Fujimoto J，Suzuki T，et al. Expression of hepatocyte groethfactor and its receptor e-met pyotooncogene in hepatocellularcercinoma[J].Heaptology，1997，25(89)：862-866.
[6] 姚登福，顾文静，李月明.肝细胞癌变过程中相关生长因子的表达与动态变化[J].世界华人消化杂志，2008，16(23)： 2570-2575.
(收稿日期：2012-03-30) (本文编辑：陈丹云)