【摘 要】
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目的:研究白及胶/微米三七膏含药血清通过核因子(NF)-κB信号通路对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞炎症损伤模型的影响.方法:取对数生长期的RAW264.7细胞,用不同浓度(5、10、15、20、25μg/mL)的LPS处理,采用CCK-8法检测细胞增殖率,确定LPS的最佳浓度,并诱导建立RAW264.7细胞炎症损伤模型;将细胞分为正常对照组、LPS组和不同浓度梯度(50、100、150、200、250、300μL/mL)的白及胶/微米三七膏含药血清+LPS组,用CCK-8法检测各组光密度(OD)值,确定
【机 构】
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陕西中医药大学 陕西咸阳 712000;陕西中医药大学附属医院 陕西咸阳 712000
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目的:研究白及胶/微米三七膏含药血清通过核因子(NF)-κB信号通路对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞炎症损伤模型的影响.方法:取对数生长期的RAW264.7细胞,用不同浓度(5、10、15、20、25μg/mL)的LPS处理,采用CCK-8法检测细胞增殖率,确定LPS的最佳浓度,并诱导建立RAW264.7细胞炎症损伤模型;将细胞分为正常对照组、LPS组和不同浓度梯度(50、100、150、200、250、300μL/mL)的白及胶/微米三七膏含药血清+LPS组,用CCK-8法检测各组光密度(OD)值,确定含药血清最佳使用浓度;将细胞分为正常对照组、空白血清组、含药血清组、LPS组、LPS+空白血清组和LPS+含药血清组,用Western blotting法测定细胞浆/细胞核NF-κB p65蛋白表达量和细胞浆p-IκBα蛋白表达量.结果:LPS最佳浓度为10μg/mL;白及胶/微米三七膏含药血清最佳浓度为250μL/mL;与正常对照组相比,LPS组细胞浆NF-κB p65蛋白表达量显著降低、细胞核NF-κB p65和细胞浆p-IκBα蛋白表达量显著增高,差异有统计学意义(P<0.01);与LPS组相比,LPS+含药血清组细胞浆NF-κB p65蛋白表达量显著增高、细胞核NF-κB p65和细胞浆p-IκBα蛋白表达量显著降低,差异有统计学意义(P<0.01).结论:通过NF-κB信号通路,白及胶/微米三七膏含药血清通过抑制NF-κB p65进入细胞核和抑制I-κBα的磷酸化,减少巨噬细胞分泌炎性因子,从而改善LPS诱导的炎症反应.
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