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应用RT-PCR、Nested PCR和Half-nested PCR技术从实验感染兔脾组织的总RNA中得到了覆盖猪瘟病毒(CSFV)C-株全基因组的7个cDNA重叠片段,分别克隆于pMD18-T或pGEM-T Easy载体后进行测序.运用T-A克隆和多片段一步连接法,将cDNA重叠片段F1、F2、F3、F4与F5、F6、F7分别克隆到pGEM-5Zf(+)载体后,得到两个半长cDNA亚克隆重组质粒pGEM-5Zf(+)/F1-4和pGEM-5Zf(+)/F5-7,再将两个半长cDNA重叠片段连接并克隆到