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构建定量逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)的内参标准,用以检测铜代谢过程中Ctrl基因mRNA表达的变化情况。采用双引物,经2次克隆将400bp左右的外源基因片段插入到530bp目的片段的单酶切位点中,构建成突变型DNA阳性竞争重组质粒。结果,成功构建了930bp左右的竞争模板重组质粒。