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以D 乳酸高产菌菊糖芽胞乳杆菌Y28基因组DNA为模板，通过PCR扩增得到960 bp的磷酸果糖激酶基因（ pfk）。氨基酸序列比对分析表明，该磷酸果糖激酶（ PFK）与其他乳酸菌PFK具有保守的底物结合位点，但是其变构效应物结合位点存在差异。将pfk基因克隆到表达载体pSE380上，获得重组菌E pSE pfk。进一步通过诱导条件的优化，重组菌的PFK比酶活达到4？89 U/mg，是优化前的4？79倍。采用低温诱导策略有助于实现菊糖芽胞乳杆菌pfk基因在大肠杆菌中可溶性表达。