【摘 要】
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为实现对烟草叶片中烟草赤星病菌的SYBR Green I实时定量PCR(q-PCR)快速检测,根据链格孢属ITS基因序列差异位点,设计了1对特异性引物。通过构建含有目的片段的重组质粒,建立了标准曲线,构建了q-PCR快速定量检测方法并对感病叶片进行检测,灵敏度达到1.0×10-3 ng/μL。实验样品验证表明,该方法可以对烟草赤星病菌进行快速检测和定量。
【机 构】
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西南大学植物保护学院,中国农业科学院烟草科学研究所,中国烟草总公司贵州省公司,中国烟草总公司四川省公司,陕西省烟草公司商洛市公司,重庆烟草科学研究所,重庆市烟草公司酉阳分公司
【基金项目】
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中国烟草公司重庆市烟草公司科技项目“重烟草病害靶向免疫控病技术研究应用与产品研发”(A20201NY02-1306)、“重庆烟草叶斑病传播阻断与保护预防技术研究”(B20211-NY1315)。
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为实现对烟草叶片中烟草赤星病菌的SYBR Green I实时定量PCR(q-PCR)快速检测,根据链格孢属ITS基因序列差异位点,设计了1对特异性引物。通过构建含有目的片段的重组质粒,建立了标准曲线,构建了q-PCR快速定量检测方法并对感病叶片进行检测,灵敏度达到1.0×10-3 ng/μL。实验样品验证表明,该方法可以对烟草赤星病菌进行快速检测和定量。
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