系统性红斑狼疮患者B细胞激活因子mRNA定量测及其意义

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目的建立实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测人B细胞激活因子(BLyS)mRNA含量的方法,初步探讨BLyS表达水平与系统性红斑狼疮(SLE)的相关性.方法在BLyS基因保守区设计特异性的引物和荧光探针,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,以标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中BLyS mRNA含量,并以BLyS mRNA和内参β2MmRNA含量的比值作为评价BLyS表达水平的指标.结果本法检测BLyS mRNA含量的线性范围为109 pg/ml~101pg/ml,批内和批间变异系数(CV)分别为2.4%~7.4%和4.3%~12.3%.SLE患者BLyS mRNA表达水平(1.45±0.33)显著高于健康献血员(0.88±0.13),P<0.01,而且与血清IgG水平和抗ds-DNA抗体滴度有显著相关性.结论建立RFQ-PCR检测BLyS mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;BLyS在SLE的发生、发展及预后等方面可能具有重要作用.
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