【摘 要】
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【目的】分析日本血吸虫可溶性虫卵抗原的特异组分,为建立牛血吸虫病免疫学诊断方法提供数据支持。【方法】用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹法(Western-blot)、葡
【机 构】
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西南民族大学生命科学与技术学院; 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所; 四川省动物疫病预防控制中心;
【基金项目】
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四川省科技厅应用基础研究“基于日本血吸虫转录组深度分析的动物血吸虫病ELISA诊断方法的建立及应用面上”(2018JY0639)
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【目的】分析日本血吸虫可溶性虫卵抗原的特异组分,为建立牛血吸虫病免疫学诊断方法提供数据支持。【方法】用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹法(Western-blot)、葡聚糖凝胶层析和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA),对日本血吸虫可溶性虫卵抗原进行了分离、鉴定。【结果】SDS-PAGE分离出10条蛋白条带,依次为100、80、60、55、45、28、27、17、15和13 KDa的小分子量蛋白;采用阳性病牛血清进行Western-blot,共鉴定出有3条特异带,分子量分别为50、28、17 KDa,28和17KDa条带较为明显,而50KDa条带较弱;葡聚糖凝胶层析分离出2个蛋白质高峰,即大分子量蛋白组分峰(I峰)和小分子量蛋白组分峰(II峰);再经Dot-ELISA鉴定表明,II峰中高速离心后的上清蛋白是可用于牛血吸虫病诊断的特异性抗原。【结论】葡聚糖凝胶层析分离出的Ⅱ峰蛋白再经过高速离心后,其上清蛋白是能够用于牛日本血吸虫病诊断的特异性天然蛋白。
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