【摘 要】
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目的 探究长链非编码RNA LINC00943对结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞迁移能力的影响及机制.方法 取小鼠巨噬细胞MH-S随机分为对照组和模型组,对照组常规培养,模型组细胞使用感染复数为10的结核分枝杆菌H37Ra感染,随后将LINC00943小干扰RNA设为si-LINC00943组,阴性对照小干扰RNA设为si-NC组,miR-125b-5p模拟物设为miR-125b-5p mi组,阴性对照寡核苷酸设为miR-NC组转染至模型组细胞中.采用激光共聚焦显微镜观察细胞内细菌荧光强度及细胞感染比例;
【机 构】
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遵义医科大学 附属医院医学检验科,贵州 遵义 563000;遵义医科大学 检验医学院,贵州 遵义 563000;遵义医科大学 基础医学院免疫学教研室,贵州 遵义 563000
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目的 探究长链非编码RNA LINC00943对结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞迁移能力的影响及机制.方法 取小鼠巨噬细胞MH-S随机分为对照组和模型组,对照组常规培养,模型组细胞使用感染复数为10的结核分枝杆菌H37Ra感染,随后将LINC00943小干扰RNA设为si-LINC00943组,阴性对照小干扰RNA设为si-NC组,miR-125b-5p模拟物设为miR-125b-5p mi组,阴性对照寡核苷酸设为miR-NC组转染至模型组细胞中.采用激光共聚焦显微镜观察细胞内细菌荧光强度及细胞感染比例;划痕愈合实验检测细胞迁移能力;双荧光素酶实验验证LINC00943与miR-125b-5p的结合关系;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-125b-5p的表达水平.结果 与对照组相比,模型组细胞内的细菌荧光强度及细胞感染比例显著增加(P<0.05),说明MH-S细胞感染H37Ra菌株的模型建立成功;敲低LINC00943可降低细胞内的细菌荧光强度、细胞感染比例及细胞迁移率;双荧光素酶实验证实LINC00943可与miR-125b-5p靶向结合;敲低LINC00943可促进miR-125b-5p的表达.结论 敲低LINC00943可抑制结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞的迁移,其作用机制可能与上调miR-125b-5p的表达有关.
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