观察钠氢交换蛋白1(NHE1)抑制剂对烧伤脓毒症大鼠肠道损伤的作用，并初步探讨其可能机制。
方法取SD大鼠90只，按照随机数字表法分为对照组、单纯脓毒症组和NHE1抑制剂组，每组30只。单纯脓毒症组和NHE1抑制剂组大鼠背部建立20%TBSA Ⅲ度烫伤(下称烧伤)模型后，背部创面中心注射2×105 CFU/mL的铜绿假单胞菌ATCC 27853菌液50 μL。烧伤脓毒症模型建立成功后，NHE1抑制剂组大鼠迅速腹腔注射0.1 mmol/L NHE1抑制剂卡立泊来德0.4 mg/kg，单纯脓毒症组大鼠注射同体积的生理盐水。对照组大鼠除不制作烧伤创面和接种细菌外，其余操作与单纯脓毒症组大鼠相同。烧伤脓毒症大鼠在伤后12 h剖腹，于回肠远端注射0.1 mol/L异硫氰酸荧光素(FITC)－葡聚糖200 mL，30 min后左心室采血，切取回肠末端组织。荧光分光光度计检测大鼠血清FITC－葡聚糖含量(样本数为10)，HE染色观察肠道组织形态(样本数为10)，ELISA法检测血清和肠道组织IL－6和TNF－α含量(样本数均为20)，比色法检测血清和肠道组织髓过氧化物酶(MPO)活性(样本数均为20)，蛋白质印迹法检测肠道组织NF－κB－p65蛋白表达及MAPK信号通路相关蛋白p38MAPK、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)以及c－Jun氨基末端激酶1/2(JNK1/2)磷酸化水平(样本数为4)。对照组大鼠于相同时相点同前采集标本进行相关检测。对数据行单因素方差分析、SNK检验。
结果(1)单纯脓毒症组大鼠血清FITC－葡聚糖含量较对照组明显升高(P<0.01)，NHE1抑制剂组大鼠血清FITC－葡聚糖含量则较单纯脓毒症组显著降低(P<0.01)。与对照组比较，单纯脓毒症组大鼠肠黏膜可见大量炎性细胞浸润、黏膜溃疡以及黏膜坏死；NHE1抑制剂组大鼠肠道损伤情况较单纯脓毒症组有显著好转。(2)单纯脓毒症组大鼠血清IL－6、TNF－α、MPO含量分别为(387±42)、(164.7±10.1)ng/mL及(7.5±1.5)U/mL，显著高于对照组的(75±17)、(13.1±6.5)ng/mL和(2.3±0.7)U/mL(P值均小于0.01)；NHE1抑制剂组大鼠血清IL－6、TNF－α、MPO含量分别为(176±37)、(64.9±9.3)ng/mL和(5.9±0.8)U/mL，均显著低于单纯脓毒症组(P值均小于0.01)。(3)单纯脓毒症组大鼠肠道组织IL－6、TNF－α、MPO含量分别为(190±13)、(172.8±29.7)ng/mL及(8.7±1.5)U/mL，显著高于对照组的(20±3)、(11.9±2.3)ng/mL和(2.9±0.3)U/mL(P值均小于0.01)；NHE1抑制剂组大鼠肠道组织IL－6、TNF－α、MPO含量分别为(35±6)、(45.2±6.1)ng/mL和(5.3±0.6)U/mL，均显著低于单纯脓毒症组(P值均小于0.01)。(4)单纯脓毒症组大鼠肠道组织NF－κB－p65蛋白表达量和p38MAPK、ERK1/2磷酸化水平显著高于对照组(P值均小于0.01)，NHE1抑制剂组大鼠肠道组织NF－κB－p65蛋白表达量和p38MAPK磷酸化水平明显低于单纯脓毒症组(P值均小于0.01)，3组大鼠肠道组织JNK1/2磷酸化水平无明显差异(P值均大于0.05)。
结论抑制NHE1可显著减轻烧伤脓毒症诱导的大鼠肠道损伤，其机制可能为通过调控NF－κB及p38MAPK信号通路，抑制肠道炎症反应。